Endo beta mananasa en Hypothenemus hampei

De Wikinsecta

Identificación de una endo β-mananasa en el tracto digestivo de la broca del café Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleoptera: Curculionidae)*

Beatriz Elena Padilla H., José Ricardo Acuña Z., Juan José Vásquez O., José David Rubio G., Claudia
Patricia Flórez R.
Bacterióloga, Esp. en Biología Molecular y Biotecnología, Investigador Científico III, Biólogo, Ing. Agrónomo e Ing. Agrónóma, Ph.D.,
respectivamente. Disciplina de Mejoramiento Genético y Biotecnología, Centro de Investigaciones del Café, Cenicafé, Chinchiná,
Caldas. beatrizelena.padilla@cafedecolombia.com, ricardo.acuna@cafedecolombia.com, juanjose.vasquez@cafedecolombia.com, jose.
rubio@cafedecolombia.com, claudia.florez@cafedecolombia.com


El galactómanano es un componente de las paredes celulares de la semilla del café y corresponde al 22% de
los polisacáridos que la componen. En los jugos digestivos de la broca se encuentran enzimas que transforman
este polisacárido en moléculas simples que son absorbidas por el insecto en el proceso de nutrición. En
este trabajo se identificó por primera vez en el genoma de un insecto, una endo-β-mananasa que se expresa
en el intestino de la broca. Se obtuvo la secuencia completa del gen y se clonó en un vector de expresión
in vitro, empleando células de Spodoptera frugiperda (SF9) mediante la metodología del baculovirus recombinante.
La proteína recombinante se purificó a partir de cultivos de células tranfectadas y se verificó
su actividad enzimática mediante reacción con galactomanano extraído del café. La endo β-mananasa de
la broca tiene un peso molecular de 35.62 kda, un punto isoeléctrico de 4.72 y una actividad enzimática en
el rango de pH 5 a 11 y 15-50°C. Estudios de genómica comparativa con la “falsa broca” (Hypothenemus
obscurus) permitieron establecer una hipótesis sobre el origen evolutivo del gen de la mananasa que le
confirió a la broca una ventaja adaptativa para conquistar al grano de café como el nicho donde cumple su
ciclo de vida.


  • Publicado en: Resúmenes Sociedad Colombiana de Entomología (Socolen) XXVIII Congreso, Cali, Colombia, julio 16 - 18 de 2008.
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